忍冬提取液對酸土脂環酸芽孢桿菌生長曲線、細胞形態和生物膜形成能力的影響（三）
2.結果與分析
2.1忍冬不同部位總酚、總黃酮和綠原酸含量
對金銀花、忍冬葉和忍冬藤的總酚、總黃酮和綠原酸含量進行測定，結果表明忍冬葉和金銀花生物活性成分含量相接近，但忍冬藤中活性成分顯著低于金銀花和忍冬葉（P<0.05，圖1）。忍冬不同部位總酚含量依次為金銀花>忍冬葉>忍冬藤，金銀花總酚含量為20.29 mg/g，是忍冬葉和忍冬藤含量的109.68%、272.72%；忍冬不同部位總黃酮含量依次為忍冬葉>金銀花>忍冬藤，忍冬葉總黃酮含量為43.32 mg/g，是金銀花和忍冬藤的108.81%、291.13%；金銀花綠原酸含量與忍冬葉無顯著差異（P>0.05），分別為12.86、11.29 mg/g，但均顯著高于忍冬藤綠原酸含量（P<0.05）。章艷玲比較了忍冬不同部位中黃酮類化合物含量，表明忍冬葉的黃酮類化合物最多，其次是金銀花，忍冬藤含量最少；路俊仙等在測定忍冬不同部位化學成分含量時也發現金銀花和忍冬葉中綠原酸含量高于忍冬藤；這些研究與本研究結果相一致。另外，有文獻報道，忍冬藤提取物對脂多糖誘導的RAW 264.7細胞分泌的炎癥因子具有顯著的抑制作用，促進骨折愈合，并具有較好的抗炎效果。因此，進一步對忍冬藤生物活性成分挖掘對開發忍冬資源具有重要意義。由此可見，研究金銀花、忍冬葉和忍冬藤中活性成分對提高忍冬附加值具有重要意義。
圖1忍冬不同部位生物活性物質含量
注：不同小寫字母表示在不同部位同一物質間差異顯著（P<0.05）。
2.2忍冬不同部位提取液抑菌譜
金銀花、忍冬葉和忍冬藤提取液具有廣譜的抗菌性，對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌均有一定的抑菌效果（表1）。金銀花和忍冬葉提取液對A.acidoterrestris、S.agalactiae、L.monocytogenes、S.aureu、B.subtilis、E.coli和Salmonella均有一定的抑制作用。其中對A.acidoterrestris的抑制效果最強；對S.agalactiae、L.monocytogenes和S.aureus亦為敏感；對B.subtilis、E.coli和Salmonella也顯示出一定的抑制作用，且忍冬葉對A.acidoterrestris的抑制作用與金銀花無顯著性差異（P>0.05）。忍冬藤提取液對A.acidoterrestris的抑菌效果略差于金銀花和忍冬葉，對S.agalactiae、L.monocytogenes、S.aureus和E.coli顯示出一定的抑菌特性，但抑菌效果低于金銀花和忍冬葉。Xiong等研究表明，忍冬葉對S.aureus和E.coli有顯著的抗菌活性，且對S.aureus的抑菌效果更強，與本研究結果一致。本研究結果表明忍冬不同部位提取液對A.acidoterrestris抑菌效果較強，尤其是金銀花和忍冬葉提取液。但忍冬提取物對A.acidoterrestris的抑菌特性鮮有報道。因此，本文接下來進一步研究金銀花和忍冬葉提取液對A.acidoterrestris的抑菌特性。
表1忍冬不同部位提取液抑菌圈直徑
注：L.acidophilus、L.plantarum、L.rhamnosus、A.acidoterrestris、S.agalactiae、L.monocytogenes、S.aureus、B.subtilis為革蘭氏陽性菌（G+）；E.coli、Salmonella、C.jejuni為革蘭氏陰性菌（G?）。抑菌圈打孔直徑為6 mm，在抑菌圈直徑=6 mm時，表示抑菌作用實際為0；抑菌圈直徑>12 mm為菌種對藥物高敏感；9~12 mm為中敏感；6~9 mm為低敏感；=6 mm為不敏感。不同大寫字母表示同一部位不同菌株間差異顯著（P<0.05），不同小寫字母表示不同部位同一菌株間差異顯著（P<0.05）。
忍冬不同部位提取液對菌株抑菌作用具有差異性的研究亦有報道。Yan等研究表明忍冬藤提取液對S.aureus的抑菌效果比金銀花和忍冬葉提取液弱；任敏等發現忍冬藤提取物對S.aureus的抑菌作用最弱，這與本研究結果一致。金銀花、忍冬葉和忍冬藤的抑菌效果存在差異，可能是因為忍冬不同部位主要生物活性物質不同，雖然金銀花和忍冬葉均含一定量的多酚、黃酮和綠原酸類活性物質，但其單體化合物存在差異，導致其對菌株的敏感性不同。有文獻報道，金銀花中的化學成分種類更多，其中蘆丁和異綠原酸B只在金銀花中檢測到，而金銀花和忍冬葉中均含有綠原酸、異綠原酸A和異綠原酸C，但忍冬藤中異綠原酸A和異綠原酸C含量較低。異綠原酸A具有比綠原酸更強的殺菌活性，原因是疏水相互作用和氫鍵都有助于異綠原酸A插入POPG脂雙層，并且奎寧酸部分是異綠原酸A中與POPG脂雙分子層形成氫鍵的關鍵結構。因此，金銀花和忍冬葉提取液中較高含量的多酚、黃酮和綠原酸等生物活性成分，使得其抑菌能力高于忍冬藤。
另外，忍冬提取液雖然對革蘭氏陽性菌敏感，但對L.acidophilus、L.plantarum和L.rhamnosus這三株益生菌均無抑制特性，這對忍冬精深加工及藥物開發具有重要意義，其機理特性有待于進一步研究。
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