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低聚果糖在體外對(duì)大腸桿菌、嗜酸乳桿菌生長(zhǎng)曲線的影響(二)

來(lái)源:廣東畜牧獸醫(yī)科技 發(fā)布時(shí)間:2025-07-11 15:37:20 瀏覽:3 次

1.4.5大腸桿菌OD值測(cè)定


取LB肉湯培養(yǎng)基200μL于96孔板內(nèi),接種稀釋的10??倍大腸桿菌菌液100μL,每組3個(gè)平行,置36±1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)24h,每隔3個(gè)小時(shí)630nm測(cè)定吸光度,連續(xù)測(cè)定24h并繪制生長(zhǎng)曲線。


1.4.6嗜酸乳桿菌OD值測(cè)定


分別取MRS肉湯培養(yǎng)基200μL于96孔板內(nèi),接種稀釋的10??倍乳酸桿菌菌液100μL,每組3個(gè)平行,置36±1℃溫箱內(nèi)厭氧培養(yǎng)48h,每隔3個(gè)小時(shí)測(cè)定630nm的吸光度,連續(xù)測(cè)定48小時(shí)并繪制生長(zhǎng)曲線。


1.5試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)


試驗(yàn)中所有數(shù)據(jù)采用SPSS20.0軟件中單因素方差分析(ONE-WAY ANOVA)進(jìn)行統(tǒng)計(jì),P<0.05為差異顯著,P>0.05為差異不顯著,均采用Duncan法進(jìn)行多重比較。


2結(jié)果


2.1低聚果糖對(duì)大腸桿菌的影響

低聚果糖對(duì)大腸桿菌活菌數(shù)的影響:活菌計(jì)數(shù)試驗(yàn)結(jié)果顯示,大腸桿菌在20g/L、30g/L、40g/L濃度的低聚果糖作用下,對(duì)應(yīng)的菌落數(shù)分別為5.10×10?cfu/mL、4.17×10?cfu/mL、5.53×10?cfu/mL,對(duì)照組菌落數(shù)為6.53×10?cfu/mL,其中低聚果糖30g/L組大腸桿菌活菌數(shù)顯著(P<0.05)且低于對(duì)照組,其余兩組活菌數(shù)雖低于對(duì)照組但無(wú)差異性(P>0.05),具體變化如圖1所示。

低聚果糖對(duì)大腸桿菌OD值的影響:通過(guò)測(cè)量大腸桿菌生長(zhǎng)曲線,如圖2所示,大腸桿菌在轉(zhuǎn)接后的6小時(shí)內(nèi)生長(zhǎng)速度比較緩慢,在6~9h內(nèi)生長(zhǎng)速度較快,9h后菌體濃度開始趨于穩(wěn)定,可知大腸桿菌可以利用低聚果糖。圖2中,20g/L低聚果糖組在0~24h增殖速度相比對(duì)照組、30g/L、40g/L較快;18h以后對(duì)照組大腸桿菌濃度比其他二組高,且18h開始其菌體濃度趨于穩(wěn)定,此時(shí)大腸桿菌在630nm的OD值分別為:0.89、0.70、0.78、0.79,其中30g/L低聚果糖組大腸桿菌菌體數(shù)量最低。綜上可知,30g/L濃度的低聚果糖可使大腸桿菌的增值速度降低。


2.2低聚果糖對(duì)嗜酸乳桿菌的影響

低聚果糖對(duì)嗜酸乳桿菌活菌數(shù)的影響:活菌計(jì)數(shù)試驗(yàn)結(jié)果顯示,乳酸桿菌在20g/L、30g/L、40g/L濃度的低聚果糖作用下,對(duì)應(yīng)的活菌數(shù)分別為3.57×10?cfu/mL、3.93×10?cfu/mL、3.40×10?cfu/mL,對(duì)照組菌落數(shù)為3.27×10?cfu/mL,其中30g/L低聚果糖組較其他組增值效果明顯(P>0.05);20g/L、40g/L與對(duì)照組嗜酸乳桿菌菌落數(shù)相比,雖有增長(zhǎng),但無(wú)顯著差異性(P>0.05)。說(shuō)明添加一定量的低聚果糖對(duì)嗜酸乳桿菌均起增值作用,其中30g/L添加量效果較好。具體變化如圖3所示。

低聚果糖對(duì)嗜酸乳桿菌OD值的影響:通過(guò)測(cè)量嗜酸乳桿菌生長(zhǎng)曲線,如圖4所示,在轉(zhuǎn)接后的15h內(nèi)乳酸菌的生長(zhǎng)比較緩慢,在15~30h內(nèi)乳酸菌生長(zhǎng)速度較快,在36h開始菌體濃度開始趨于穩(wěn)定,此時(shí)嗜酸乳桿菌在630nm的OD值分別為:1.18、1.20、0.98、1.22。圖4中,在24h時(shí)40g/L濃度組嗜酸乳桿菌的增殖速度開始降低;綜上可知,40g/L濃度低聚果糖使嗜酸乳桿菌的增值速度降低,添加低聚果糖20g/L、30g/L與對(duì)照組接近無(wú)顯著差異。


3結(jié)論與分析


腸道菌群對(duì)腸道有著重要的保護(hù)作用,正常比例的腸道菌群可以有效的抵御外來(lái)病原的入侵,維持腸道內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定和微生態(tài)平衡。大腸桿菌是人及各種動(dòng)物腸道中重要的正常寄生菌,嗜酸乳桿菌是微生態(tài)平衡中起重要作用的菌種之一,體外實(shí)驗(yàn)采用活菌計(jì)數(shù)法,以活菌數(shù)量計(jì)數(shù)、活菌生長(zhǎng)曲線為判斷標(biāo)準(zhǔn),對(duì)比了兩菌種的生長(zhǎng)情況,可以清晰地看出低聚果糖對(duì)大腸桿菌和乳酸桿菌這兩種重要的腸道菌的生長(zhǎng)影響。


在以低聚果糖為唯一碳源的麥康凱培養(yǎng)基和MRS培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌和乳酸桿菌,結(jié)果顯示,低聚果糖在體外可以抑制大腸桿菌的生長(zhǎng),促進(jìn)嗜酸乳桿菌的生長(zhǎng),適宜濃度為30g/L,本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與Blaut等人對(duì)功能性低聚糖能夠抑制有害菌促進(jìn)有益菌生長(zhǎng)的研究結(jié)果一致,為動(dòng)物臨床試驗(yàn)以及推廣提供科學(xué)依據(jù)。


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